烟草在线—吸烟有害健康！

应用技术部资深工程师传授“荧光定量PCR实验技术”。　　工程师系统全面地介绍了荧光定量PCR的技术原理、应用领域、操作规范、分析方法、注意事项及常见问题，针对团队研究任务，

发明利用烟草各个发育时期的44个组织样品，通过实时荧光定量PCR实验比较HSC70-1基因与烟草常用的8个内参基因的表达稳定性，发现其表达稳定性优于所有8个常用内参基因。可见

和实时荧光定量PCR反应步骤。据称，该发明通过对烤烟在团棵期、旺长期、现蕾期、打顶后、成熟期5个生育期的SPS酶基因的表达情况进行测定，从而明确不同生育期蔗糖磷酸合成酶基因

，进行实时荧光定量PCR扩增，计算得到各烟草品种所述与生物碱合成相关的基因的相对表达量；（3）预判各烟草品种成熟期叶片的生物碱相对含量

所述cDNA为模板，利用所述特异性引物进行实时荧光定量PCR，得到各自的Ct值；（4）根据所述Ct值，利用标准曲线

类型"，这两种类型的突变体具有不同的香气指纹图谱。对香气代谢途径中5个关键酶基因进行荧光定量表达分析发现，两种类型的突变体在基因表达水平上具有较大差异，在

，从普通烟草K326中克隆到NtGGPPS1基因。构建荧光表达载体PFF19-NtGGPPS1-GFP，对NtGGPPS1基因进行亚细胞定位研究。通过荧光定量PCR分析了普通

研究为了深入研究NtGGPPSL　基因的功能，通过实时荧光定量PCR（Real-time　PCR）分析NtGGPPSL　基因在普通烟草不同时期和器官中的表达

中发挥着重要作用，主要由NADPH氧化酶系统产生。为明确NADPH氧化酶NbRbohB基因在本氏烟与疫霉菌亲和与非亲和性互作中的功能，该研究组采用荧光定量PCR技术以及病毒诱导的基因沉默

copies/μL，优于实时荧光定量pcr技术，可实现单头介体内TSWV定量鉴定检测，对于TSWV病毒病精准预防具有重要实践价值。烟草所硕士研究生张万红和焦裕

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